डीएनए संश्लेषणाचे मूलभूत तत्त्व

रासायनिक डीएनए संश्लेषण घन-फेज संश्लेषण धोरण आणि फॉस्फोरामिडाइट रसायनशास्त्रावर आधारित आहे.जैविक डीएनए संश्लेषणापेक्षा वेगळे, रासायनिक डीएनए संश्लेषणातील सामग्री डीएमटी (4, 4-डायमेथॉक्सीट्रिटाइल) आणि फॉस्फोरामिडाईट सुधारित डीऑक्सीरीबॉक्साईसाइड आहे, आकृती 1 मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे. डीएनए संश्लेषण ठोस आधारावर चालते (आम्ही विविध ऑफर करू शकतो.ऑलिगो संश्लेषण स्तंभ), म्हणजे CPG (नियंत्रित छिद्र ग्लास) आणि PS (पॉलीस्टीरिन), आणि संपूर्ण संश्लेषणDNA/RNA सिंथेसायझर, जे आमचे मुख्य उपकरण आहे, त्याचे वेगळे मॉडेल आहे जसे की: HY सिंगल चॅनल सिंथेसायझर, HY-12, HY-192 आणि इत्यादी, संश्लेषणाची दिशा 3' ते 5' पर्यंत आहे आणि एक द्वारे घन सपोर्टसाठी न्यूक्लियोटाइड सादर केला जातो. संश्लेषण चक्र.सामान्यत: संश्लेषण चक्रामध्ये चार पायऱ्या असतात, डिप्रोटेक्शन, कपलिंग, कॅपिंग आणि ऑक्सिडेशन (आकृती 2).डीप्रोटेक्शन हे सॉलिड सपोर्टवरील डीएमटी ग्रुप किंवा मागील न्यूक्लिओसाइडवरील 5' हायड्रॉक्सिल ग्रुप काढून टाकण्यासाठी सेट केले आहे, डिक्लोरोमेथेनमधील 3% ट्रायक्लोरोएसेटिक ऍसिड डिप्रोटेक्शन अभिकर्मक म्हणून वापरले जाते.नंतर फॉस्फोरामिडाईट सुधारित डीऑक्सीरिबॉक्साईडला ऍक्‍टिव्हेटरच्या सहाय्याने हायड्रॉक्सिल ग्रुपला, म्हणजे 5-इथिलथिओटेट्राझोल किंवा 4, 5-डायसायनोइमिडाझोल, फॉस्फेटेट्रिस्टर (III) तयार करण्यास परवानगी दिली आणि कपलिंग चरण लक्षात आले.कपलिंग स्टेप दरम्यान प्रतिक्रिया न झालेल्या हायड्रॉक्सिल ग्रुपला ब्लॉक करण्यासाठी, अवांछित दोष अनुक्रमांची निर्मिती कमी करण्यासाठी कॅपिंग स्टेप केली जाते.शेवटी, अस्थिर फॉस्फिटेट्रिस्टर (III) चे रासायनिक स्थिर फॉस्फोर्ट्रिस्टर (V) मध्ये ऑक्सिडाइझ केले जाते ज्यामध्ये आयोडीन ऑक्सिडंट म्हणून pyridine आहे.

संश्लेषित डीएनए अमिनोलिसिसद्वारे घन आधारापासून क्लीव्हेज असू शकते, फॉस्फोर्ट्रिस्टरवरील 2-सायनोइथिल संरक्षित गट आणि न्यूक्लिओबेसवरील अमाइड एकाच वेळी क्लीव्हेज केले जाते, रॅकमधील सिंथेसिस प्लेट्स आणि सिंथेसिस कॉलम थेट प्रतिक्रिया कक्षामध्ये ठेवल्या जातात. यासंरक्षण उपकरणे.मागणीनुसार एचपीएलसी, इलेक्ट्रोफोरेसीस आणि ओपीसीद्वारे क्रूड डीएनए तयार केला जाऊ शकतो, आम्ही तुम्हाला प्रदान करू शकतोशुध्दीकरण उपकरणेपोस्ट-प्रोसेसिंगसाठी.